近日，我院衛生檢驗與檢疫系汪川教授團隊與廣東省深圳市疾病預防控制中心王曉輝主任技師共同研究發現了一個新的新冠病毒（SARS-CoV-2） B細胞表位肽，在微生物領域期刊 BMC MICROBIOLOG在線發表了一篇研究性論文“A newly identified linear epitope on non-RBD region of SARS-CoV-2 spike protein improves the serological detection rate of COVID-19 patients”。該論文第一完成單位為澳门新葡萄新京威尼斯華西公共衛生學院（澳门新葡萄新京威尼斯）。第一作者為汪川教授的博士研究生張雲雯，汪川教授與王曉輝主任技師為論文的共同通訊作者。（https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34174835/）

截至2021年6月30日，世衛組織報告的2019冠狀病毒病确診病例超過1.8億，死亡病例超過390萬。除核酸檢測外，抗體檢測在COVID-19确診中也越來越受到重視。血清學檢測具有快速、方便的優點，有助于大規模人群傳染病的确診和跟蹤。特異性抗體的檢測有助于疑似病例的确診和無症狀感染者的識别。利用從全抗原中鑒定出的特異性表位肽作為檢測抗原是敏感且相對經濟的。基于表位肽的COVID-19患者檢測試劑盒的開發需要全面掌握表位肽信息。但關于SARS-CoV-2 Spike蛋白（S蛋白）B細胞表位肽的資料仍然有限。更重要的是，缺乏人群中B細胞表位肽的血清學數據。

S蛋白是SARS-CoV-2的主要檢測靶抗原。S蛋白誘導的特異性抗體，特别是針對受體結合域（receptor binding domain, RBD）的中和抗體，在抑制病毒感染中起主要作用。抗S抗體和抗RBD抗體均與中和抗體正相關，且與疾病嚴重程度正相關。抗S抗體還能間接反映血清的中和活性及疾病的嚴重程度。因此，S蛋白是一種理想的抗原檢測靶蛋白。

本研究利用SARS-CoV-2 S蛋白重疊肽段庫與COVID-19患者恢複期血清，鑒定出位于SARS-CoV-2 S蛋白非RBD區的兩個B細胞線性表位肽P104和P82。并在165份血清樣品進行了驗證。P104是新鑒定的B細胞表位肽，P82包含于之前Poh報道的表位肽S21P2中。Poh等鑒定的兩個非RBD區表位肽S14P5和S21P2以及P82和P104在165份恢複期血清（包括30例無症狀患者）中的陽性反應率分别為77.0%、73.9%、61.2%和30.3%。雖然P104在所有患者中陽性率最低（30.3%），但在無症狀感染者的檢測中有一定優勢（36.7%）。表位肽組合提高了陽性反應率（P<0.01）。在所有聯合模式中，（S14P5 + S21P2 + P104）模式在所有患者中陽性率最高（92.7%），在無症狀感染者中陽性率最高（86.7%），證實了P104作為補充抗原進行血清學檢測的可行性。研究證明了非RBD區表位肽在血清學檢測中具有價值，尤其在聯合多個表位的情況下，可以大大提高檢測陽性率。新的表位肽的發現為應用peptide-ELISA檢測COVID-19患者提供了實驗數據支持。

圖1 兩個B細胞表位肽P82和P104在新冠病毒S蛋白上的定位

圖2 四個B細胞表位肽S21P2、S14P5、P82和P104與恢複期患者血清的陽性反應率（間接ELISA法）